domingo, 28 de octubre de 2012


2.1.2  EQUIPO Y MATERIAL DE LABORATORIO

El material y equipo de laboratorio en el cultivo de tejidos, requiere de materiales que permitan la preparación de fórmulas nutrimentales con el objetivo de cultivar tejidos, órganos y células vegetales in vitro (Elliott 1972; Jones). A continuación se presentarán los diferentes materiales que se encuentran en un laboratorio de biotecnología:

 Cristalería

La cristalería de uso más común para el cultivo de tejidos se selecciona de la que se utiliza en experimentos químicos o de microbiología; sin embargo, poco de este material está diseñado especialmente por investigadores.

Se utiliza bastante material de vidrio en la preparación de medio de cultivo y en la siembra de tejidos vegetales. Los cuales son:

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Tubos de ensayo

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Matraces Erlenmeyer

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Cajas de petri

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Botellas para cultivo

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Botellas para reactivos y soluciones madre

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Pipetas, goteros, probetas y matraces

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Vasijas de vidrio para la distribución de medio de cultivo

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Jeringas dispensoras

 Instrumentos y aparatos

Para el cultivo de tejidos hay pocos aparatos e instrumentos diseñados especialmente para este propósito. Sin embargo, se pueden escoger varios instrumentos médicos, así como también muchos aparatos de microbiología.

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Filtros y esterilizadores

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Cámara de flujo laminar

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Hornos para secado

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Autoclaves

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Refrigerador y congelador

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Balanzas

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Balanzas analíticas

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Medidores de pH

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Destilador

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Agitador magnético

 

 VENTAJAS y DESVENTAJAS DE UN LABORATORIO

Ventajas

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Se pueden tener muchísimas plantas en espacios reducidos, con condiciones controladas y a bajo costo

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Garantiza sanidad completa de las plantas hijas.

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Cuando la planta sale al campo es capaz de crecer y vivir como una planta normal.

Desventajas

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Técnica sensible en laboratorio.

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Cantidad y costo.

<!--[if !supportLists]-->ü <!--[endif]-->Inestabilidad. Muchas de las líneas celulares continuas son inestables, como consecuencia de la dotación cromosómica aneuploide

 

 Normas de laboratorio de tejidos vegetales

<!--[if !supportLists]-->Ø <!--[endif]-->Use bata de laboratorio para cada práctica y no utilice calzado destapado

<!--[if !supportLists]-->Ø <!--[endif]-->Use guantes, tapaboca, lentes de protección, y máscara con filtros

<!--[if !supportLists]-->Ø <!--[endif]-->No pipetee con la boca, use un pipeteador

<!--[if !supportLists]-->Ø <!--[endif]-->No se lleve los dedos a la boca, ojos o nariz, ni respire directamente sobre ningún reactivo pues sus vapores pueden ser tóxicos

<!--[if !supportLists]-->Ø <!--[endif]-->No ingiera alimentos o bebidas en el laboratorio

<!--[if !supportLists]-->Ø <!--[endif]-->No use durante las prácticas anillos, cadenas, prendedores, pulseras o collares

<!--[if !supportLists]-->Ø <!--[endif]-->No deposite alimentos en las neveras, ni consuma el hielo que allí se produce

<!--[if !supportLists]-->Ø <!--[endif]-->No se admiten en el laboratorio personas que no estén matriculadas en el respectivo curso, por favor no reciba visitas

<!--[if !supportLists]-->Ø <!--[endif]-->No ubique bolsos, tulas, maletines o paquetes, en los lugares de trabajo

 

 UTILIZACIÓN DE REACTIVOS

 

<!--[if !supportLists]-->Ø <!--[endif]-->Todo reactivo preparado debe rotularse con el nombre del reactivo, la persona que lo preparó y la fecha de preparación

<!--[if !supportLists]-->Ø <!--[endif]-->No arroje por los sumideros ácidos, bases o algún otro reactivo, por favor deposítelos en los recipientes de desecho

<!--[if !supportLists]-->Ø <!--[endif]-->Evite derrames de sustancias en las mesas de trabajo, así se previene que algún compañero se queme la piel o se deteriore la ropa.

<!--[if !supportLists]-->Ø <!--[endif]-->No arroje al piso ningún reactivo

 

2.1.2.1 MATERIALES Y  2.1.2.2 EQUIPO DE LABORATORIO

La presente práctica se desarrolló en el laboratorio de microbiología que se localiza dentro del instituto tecnológico de cd Altamirano.

La Cd. de Altamirano municipio de Pungarabato, se localiza al noroeste del estado de Guerrero, en la región de Tierra Caliente y en las coordenadas geográficas 18°25’ de latitud norte y los 100°31’ y 100°43’ de longitud oeste. Este municipio es muy caluroso al experimentar un clima de tipo Cálido Subhúmedo con lluvias en verano y una temperatura promedio que varía de los 26 a 28 °C. Presenta una altitud de 241 msnm y una precipitación pluvial promedio de 1000 a 1,100 mm al año.

 

 Recorrido en el laboratorio de microbiología

<!--[if !vml]--><!--[endif]--> Una vez que se ingresó al laboratorio de microbiología el docente dio instrucciones para iniciar el recorrido sobre este, con la finalidad de identificar en él, las áreas que constituyen un laboratorio de cultivo de tejidos vegetales. Para ello los alumnos se turnaron para pasar debidamente a reconocer y observar estas áreas. El recorrido se hizo de forma ordenada hasta analizar por completo el laboratorio. Figura 1.


Figura 1. Laboratorio de microbiología del Instituto Tecnológico de Cd. Altamirano.

 

Durante el recorrido se fueron reconociendo las áreas y observando su estructuración, así como también identificando el material y equipo de cada una de estas; se hizo uso de una cámara fotográfica para captar cada una de las áreas, así como también de un cuaderno de notas y lapicero, para plasmar datos sobre las mismas.

 Identificación y descripción de cada área de un laboratorio de cultivo de tejidos vegetales

a)

 

b)

<!--[if !vml]--><!--[endif]-->La primer área identificada fue el área de preparación de medios de cultivo, la cual está dotada con tres balanzas analíticas, potenciómetro, cajones de madera que contienen materiales de vidrio y plástico, así como pinzas, probetas y picetas. Esta área carece de un refrigerador ya que este está situado a un lado del área de lavado. Figura 1.

 


 

Figura 1. Área de preparación de medios de cultivo: a) balanza analítica; b) mesas de trabajo.

El área de lavado y esterilización, en el laboratorio de microbiología se encuentran separadas. El área de lavado cuenta con tres lavabos y con su respectiva llave de agua fría, cuenta con escurridores y charolas de plástico, un cesto de basura, cubetas, franelas, detergente y fibras. Por su parte el área de esterilización está equipada con una parrilla de gas y una autoclave. Figura 2.

 


 

Figura 2. Área de lavado y esterilización: a) área de lavado; b) autoclave y parrilla de gas.

<!--[if !vml]--><!--[endif]-->El área de siembra está situada cerca de las mesas de trabajo en el laboratorio y cuenta solo con la campana de flujo laminar, ya que los microscopios y estereoscopios se encuentran almacenados en anaqueles en el área de reactivos bajo llave. Figura 3.

 


 

Figura 3. Campana de flujo laminar.

 

En cuanto al área de incubación en el laboratorio se buscó el lugar idóneo y con las características y parámetros adecuados para montarla, debido que se carece de esta, pero se tiene una caja de metal y cristal que se pretende adecuar para usarla como estante de incubación de cultivos. Figura 4.

 


Figura 4. Vitrina para área de incubación.

 

El laboratorio cuenta con un Área de reactivos aislada, en la cual se encuentran almacenados diversos reactivos en anaqueles metálicos, así como microscopios y estereoscopios, también contiene el apartado donde es almacenada la cristalería, como: matraz, vasos depresipitados, pipetas, frascos y cajas de Petri. Figura 5.

 


 

 

Figura 5. Área de reactivos: a) \estantes con reactivos; b) cajón de cristraleria.

Este laboratorio cuenta también con un área de oficina, desde la cual se controla el paso y uso del laboratorio, esta área cuenta con un estante metálico para libros, dos equipos computacionales, sillas y dos escritorios

sábado, 20 de octubre de 2012

 
Científico británico y japonés ganan Nobel de Medicina 2012

Nobel de medicina 2012. De madre las células del Nobel Por Manuel Vázquez*
COPENHAGUE, Dinamarca, oct. 8, 2012.- El Nobel de Medicina 2012 fue otorgado este lunes al británico John B. Gurdon y al japonés Shinya Yamanaka, que revolucionaron la visión del desarrollo de los organismos al demostrar que las células adultas pueden ser reprogramadas para desarrollar cualquier tipo de tejido. Gurdon (1933), formado en la Universidad de Oxford, en el Reino Unido, y en el Instituto de Tecnología de California, en Estados Unidos, fue el precursor que puso en entredicho el dogma de que las células adultas especializadas eran irreversibles. Un embrión está formado por células madre pluripotentes inducidas (iPS), capaces de desarrollar todos los tipos de células que componen un organismo adulto, las células adultas especializadas, en una evolución que se consideraba unidireccional A pesar del escepticismo inicial con que fue recibido, su hallazgo acabó siendo admitido al ser confirmado por otros científicos, y posibilitó una intensa investigación que permitiría entre otras cosas la clonación de animales Yamanaka y su equipo de la Universidad de Tokio encontraron finalmente en 2006 una combinación que funcionaba: introduciendo cuatro genes juntos, podían reprogramar fibroblastos -células residentes del tejido conectivo que sintetizan fibras y mantienen la matriz extracelular del tejido de muchos animales- en iPS El evidente objetivo final sería el desarrollo de novedosas terapias, incluyendo, aunque para más adelante, la tan añorada medicina regenerativa para afecciones como el Parkinson o la diabetes, y, probablemente, hasta para las temidas lesiones espinales. En esa dirección los trabajos de Yamanaka resultan sumamente valiosos, pues además de evitar el problema de los rechazos ante trasplantes de órganos o tejidos, soslayan la manipulación de embriones humanos, que provoca encendidos cuestionamientos ético-morales
                                                           Opiniones propias del tema
Bueno este descubrimiento que obtuvieron  estos  2 científicos  El británico John B. Gurdon y el japonés Shinya Yamanaka abre totalmente la puerta hacia el punto de lo posible dentro del estudio de la células del ser humano para su manipulación a conveniencia, sin duda es un gran logro, pero también es una desventaja ya que nosotros los humanos y nuestra constitución genética ya no será un paradigma para la ciencia convirtiéndonos seguramente en personas desechables que se pueden reponer con el simple hecho de la clonación y en muy poco tiempo dejaremos de ser único para recaer en el punto de lo sustituible y remplazable por otra persona idéntica a nosotros pero con muchas mejoras tanto físicamente como a nivel genético. Esto tendrá un gran repercusión en la sociedad ya que abra algunos que lo a prueben y otros que se opongan rotundamente a este cambio totalmente der ser humano. Pero por otro lado será de gran utilidad ya que las enfermedades degenerativas podrán curarse y no serán de enfermedades mortales para la vida del ser humano, la calidad de vida será cada vez mejor
Sir John B. Gurdon. Dippenhall, Reino Unido, 1933. Doctor en Ciencias (PhD) por la Universidad de Oxford en 1960. Actualmente trabaja en el Instituto Gurdon en Cambridge.

Shinya Yamanaka. Osaka, Japón, 1962. Doctor en Ciencias (PhD) por la Universidad de Osaka en 1993. Profesor en la Universidad de Kyoto, afiliado al Instituto Gladstone.
 

martes, 16 de octubre de 2012

Dimensiones Volumen Dimensiones
Modelo de Cámara de Cámara Externas (mm) ØxProfundidad (Litros) AnchoxAlturaxProf.
2540 ELV/MLV


250x400
23
495x645x335


3150 ELV


310x 500
40
580x780x415


3170 ELV


310 x 700
55
580x960x415


3850 ELV/MLV


380 x 490
62
650x745x500


3870 ELV/MLV


380 x 690
85
650x925x500


5050 ELV/MLV


500 x 500
110
880x780x700


5075 ELV/MLV


500 x 750
160
880x1010x700



TABLA DE COMPARACIÓN DE RELACIÓN ENTRE EL VOLUMEN Y LA CANTIDAD DE TIEMPO A ESTERILIZAR


Por medio de esta tabla, se muestran los recipientes de uso común en el laboratorio y la relación que existe entre el volumen o cantidad de líquido a utilizar en el laboratorio y el tiempo de exposición al calor o fuego que se necesita para esterilizarlo y de esa forma eliminar toda clase de microorganismos patógenos.



RECIPIENTE
VOLUMEN
(ml)
TIEMPO DE EXPOSICIÓN
(minutos)
Vaso de precipitado
20
12-14
Erlenmeyer
50
12-14
Erlenmeyer
200
12-15
Erlenmeyer
1000
20-25
Erlenmeyer
2000
30-35

BIBLIOGRAFÍA 
www.biol.unlp.edu.ar/microbiologiagral/anexo-lab2esterilizacio

domingo, 14 de octubre de 2012

MEDIOS DE CULTIVOS INDEFINIDOS (SUSTANCIAS NATURALES)
Son medios de cultivo de los cuales no es decisivo conocer la composición exacta.
Sustancia:
·          Extratos como ejemplo; levadura, malta, carne, patata, maíz, raíces y rizomas.Ejemplo: Agar Triptona-Extracto de Levadura (agar para cuenta estándar)
·         Jugos de frutas u hortalizas (sustancias naturales que son utilizadas como medio de cultivo); como ejemplo: (Naranja, banano, piña, tomate, patata, leche de coco, agua de coco etc.).
·         Caseína hidrolizada, como por ejemplo: Su uso es desaconsejable por no poder darse una composición precisa del extracto añadido, pueden resultar útiles sólo en casos concretos.
Se denomina levadura a cualquiera de los diversos hongos microscópicos uni celulares que son importantes por su capacidad para realizar la descomposición mediante fermentación de diversos cuerpos orgánicos, principalmente los azúcares o hidratos de carbono, produciendo distintas sustancias.
Extracto de levadura 2,5 g
Triptonga 5,0 g
Dextrosa 1,0 g
Agar 15,0 g
Agua

Ejemplo: Preparación del Agar con extracto de malta

Extracto de Malta 10 g
Agar-Agar 15 g
Procedimiento: Se pesan los ingredientes y se mezclan en el matraz con 1000 ml de agua destilada. La suspensión se calienta y agita hasta que queden totalmente disueltos los ingredientes.

Ejemplo: Preparación del Agar con papa dextrosa
Papa 200 g
Agar-Agar 15 g
Dextrosa o glucosa 20 g
Levadura 2 g
Procedimiento: Pelar y poner a hervir la papa en 500 ml de agua destilada o purificada durante 10-15 min. El extracto se filtra y se adiciona más agua hasta ajustar 1000 ml para reponer lo que se evaporó. Se agrega los otros ingredientes y se calienta a fuego lento moviendo constantemente durante 1-2 min hasta que queden totalmente disueltos.

Ejemplo: Preparación de Agar con extracto de trigo, paja y malta
Semillas de trigo 400 g
Extracto de malta 10 g
Paja de trigo 100 g
Agar-Agar 15 g
Dextrosa 10 g
Procedimiento: Hervir el trigo en un litro de agua, dejando consumir el líquido hasta aproximadamente 500 ml, esto mismo se hace con la paja. Se filtran ambos extractos y se mezclan en un recipiente, se agrega los demás ingredientes y se le adiciona agua hasta ajustar un litro, esta suspensión se calienta hasta disolver todos los ingredientes.
Ejemplo: Medio de cultivo in vitro para orquídeas
 se utilizan 3 tomates maduros cortados en trozos
1 (plátano) maduro cortado en trozos
900 ml agua
100 ml agua de coco
4 tabletas de tiamina 300 mg (vitamina B1)
Grenetina o gelatina sin sabor

Ejemplo: Agar frijol lima

Frijol lima molido 100 g
Agar-Agar 20 g
Agua destilada para completar 1000 ml

Procedimiento: se remojan los frijoles (Phaseoluslimensis)por 30 minutos. Se hierven por 30 minutos a baño maría con suficiente agua; se filtra el agua a través de una gasa; se coloca el líquido nuevamente en baño maría, se agrega el agar y se agita el líquido hasta que el agar se disuelva, se restaura el volumen del líquido hasta 1000ml con agua destilada.
Ejemplo: Agar harina de maíz
Harina de maíz 20 g
Dextrosa 20 g
Agar 20 g
Agua destilada hasta completar 1000 ml
Ejemplo: Agar jugo V-8
Jugo V-8
Carbonato de calcio
Agar-Agar
Agua destilada




BIBLIOGRAFÍA
& Antonie Van Leeuwenhoek. 35 (Suppl): pp. G27-8... Jun 1969.http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/5312005?ordinalpos=&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.SmartSearch&log$=citationsensor